YYVIP易游什么是紫外可见分光光度计

　　YY.VIPYY.VIPYY.VIPYY.VIPYY.VIP紫外-可见 (UV-Vis) 分光光度计用于通过紫外和可见光（主要为 200 至 900 nm）对样品进行量化和定性。分光镜（分光光度计的前身）的首次提及可追溯到 1814 年，当时约瑟夫·冯·弗劳恩霍夫（Joseph von Fraunhofer，当今世界著名的弗劳恩霍夫协会的赞助人）使用他发明的这种分光镜测量阳光，并发现太阳光谱中的 574 条暗固定线（夫劳恩霍夫线 年开发了一种衍射光栅，用于将光从太阳中分离出来，这距离大卫·里滕豪斯 (David Rittenhouse) 发明第一块人造衍射光栅已过去了近 40 年。

　　经过 100 多年的时间，第一台商用紫外可见分光光度计才于 1941 年由 Arnold O Beckman 发明，用于通过紫外和可见光对样品进行定性和定量分析。该仪器利用石英棱镜将钨灯发出的光分离成其吸收光谱，并利用光电管（现代光电二极管的前身）记录信号。为了解释来自灯和电子设备的背景影响，紫外可见分光光度计会测量透过样品的光强度，并自动减去所述背景，以提供代表样品确定属性的精确读数。

　　科学史研究所CC BY-SA 3.0，通过Wikimedia Commons

　　现代紫外可见分光光度计的基本光学原理没有太大变化；然而，灯、检测器、光栅和其他光学元件已经发生了重大发展，使现代仪器更加通用、更坚固、更小、更快。最新的 NanoPhotometer® 微量紫外可见分光光度计的型号具有同类产品中最高速度和最小占地面积，以及免维护的移动设计，允许在实验室内和野外的任何地方进行紫外可见光谱分析。一次 12 秒的运行内最多可以扫描和分析 20 个样品，无需昂贵的配件或耗材；还有可用的型号允许使用传统比色皿（石英、光学玻璃或塑料）读取样品。

　　Beer 教授介绍 NanoPhotometer® 紫外可见分光光度计系列（兰伯特显然对这次演讲感到非常兴奋）

　　与第一台商用紫外/可见光分光光度计（单色扫描仪）相比， NanoPhotometer® 代表一类新型紫外可见分光光度计仪器，具有多色而非单色光学装置。

　　氙气闪光灯产生的全光谱光穿过样品，然后使用多色仪分离。为了记录信号，现代紫外可见分光光度计使用 CCD 或 CMOS 检测器（线性相机），甚至可以在几秒钟内记录整个波长范围内的高分辨率光谱。

　　此外， NanoPhotometer® 紫外可见分光光度计仪器无需定期维修、维护或重新校准无需再操作仪器。这让研究人员非常放心，因为他们可以始终信赖仪器整个使用寿命内的测量结果。

　　NanoPhotometer® 紫外/可见分光光度计微量头，读数时带有压缩样品滴

　　每种分子都有一组与其化学键相关的能级，因此会吸收特定波长的光，显示出独特的光谱特性。

　　要运行实验 NanoPhotometer®，他只需滴一小滴啤酒，然后将其放在微量基座上。由于日光被视为白光（红、绿、蓝三种基本颜色的叠加 - RGB），而啤酒是黄色的，因此可以预期它会吸收蓝色范围内的光，只让绿光和红光通过（当它们重叠时，我们的眼睛会变成黄色）……瞧：扫描结果完美地证实了我们的预期！

　　那么如何从获得的信号确定浓度：让我们看一下比尔定律或比尔-朗伯定律，它对吸光度的定义如下？

　　比尔-朗伯定律，也称为比尔定律，从经验上将光的吸收与样品的特性联系起来。该定律指出，光通过特定样品的透射率 (T = I/Io，其中 I = 出射光，Io = 入射光)、特定化合物的摩尔消光系数 (ε)、材料中吸收物质的浓度 (c) 和光传播的距离 (d) 之间存在对数关系。

　　Lambert 展示了光程对紫外可见分光光度扫描的影响——光程越长，吸收率越高，这正是我们视觉实验所预期的结果

　　为了表明 Pathlength 的重要性，Lambert 再次使用了 Beer 教授最喜欢的饮料，并将其倒入小玻璃杯中，而不是他的一升大啤酒杯中（据 Lambert 说，他根本不欣赏这一点）。

　　同样的啤酒，不同的颜色。那么为什么呢：与旁边的优雅玻璃杯相比，升杯要宽得多，因此光线穿过啤酒的距离更长，与升杯的相互作用也更多。玻璃杯的宽度相当于紫外可见光谱学家所说的“光程长度”。

　　显然，Beer 教授更喜欢较长的路径长度——这是有原因的。 NanoPhotometer® 另一方面，紫外可见分光光度计则完全依靠较短的路径长度来扩展仪器的动态范围，通过对样品引入准虚拟稀释来扩展仪器的动态范围，而标准比色皿分光光度计的读数仅为 1 厘米。由于 Beer 教授更喜欢较长的路径长度，因此不确定他的手动稀释效果如何，因此虚拟稀释非常方便。:-)

　　现在我们已经了解了紫外可见分光光度计的工作原理，我们准备了解 NanoPhotometer® 可以做些什么来改善实验室的结果。

　　NanoPhotometer® 主要用于核酸（DNA、RNA、mRNA、有或无染料标记的寡核苷酸）和蛋白质/抗体的定量和鉴定， OD600 测量和许多其他应用，如液滴动力学和有机溶剂中的小分子扫描。因此，让我们来看看在计划实验时相关的规格（ NanoPhotometer® 显示在括号中。）

　　• 其他应用程序： OD600 （细胞、细菌、酵母密度）、Bradford、BCA